大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(rat TRAIL-R4 )

ELISA试剂盒--适用于血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途) 

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货号:F16993
规格: 48T96T
类型: 大鼠

产品参数


灵敏度

ng/ml

检测范围

→  ng/ml

稳定性

在4℃条件下,产品保存6个月




准备试剂与收集标本

1.  10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。

2.  收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反复冻融。

3.  标准品液配制:取8个1.5ml离心管,第一管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在第一管中加入标准品溶液100ul置于漩涡混合器上混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。

     如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。

4.  洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)。


检测程序

1.  加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃40分钟。

2.  洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。

3.  每孔加入蒸馏水和第一抗体工作液各50ul(空白除外)。将反应板充分混匀后置37℃20分钟。

4.  洗板:同前。            

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃10分钟。

6.  洗板:同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗处反应15分钟。

8.  每孔加入100ul终止液混匀。

9.  30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。


结果计算与判断

1.  所有OD值建议减除空白值后再行计算。如空白OD低于0.1,也可以直接计算。

2.  以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,使用软件作图,画出标准曲线。     

3.  根据样品OD值计算出相应含量即可。绘图软件可在本网站技术资讯下载或向本公司邮件索取。


注意事项

1.   以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。

2.   洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。

3.   检测时所有试剂都要恢复到室温。板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。

4.   试剂盒使用超敏TMB溶液,若显色过深会出现絮状物,属正常现象,不影响结果判读。

5.   说明书中试剂盒组成为96T的量,48T的量应减半!

6.   本试剂盒宜置4oC冰箱保存。仅用于科研,不能用于临床诊断!